什么是PCR實(shí)驗(yàn)室？

PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction)的簡稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng)，能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精確度高達(dá)納米級別，精確檢測乙肝病毒在患者體內(nèi)存在的數(shù)量、是否復(fù)制、是否傳染、傳染性有多強(qiáng)、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時(shí)判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗(yàn)依據(jù)。

二、PCR實(shí)驗(yàn)室布局

原則上分為四個(gè)區(qū)域：試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。

PCR實(shí)驗(yàn)室原則上為試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域并設(shè)有專用走廊，各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間，工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區(qū)應(yīng)是分隔獨(dú)立的，各工作區(qū)有明顯的標(biāo)志，不能直通，如果緊密相連，需安裝物品傳遞窗。

PCR實(shí)驗(yàn)室區(qū)域的設(shè)置并不是一成不變的，以下幾種情況需要說明：

1.如果樣本在擴(kuò)增之前需要粉碎處理，則需要增加一個(gè)區(qū)域用于樣品的粉碎。

2.如果采用實(shí)時(shí)熒光PCR法，則擴(kuò)增區(qū)和分析區(qū)可以合并為一個(gè)區(qū)。

3.如果采用全自動(dòng)化PCR分析儀，則標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和分析區(qū)可以合并為一個(gè)區(qū)。

前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū)，后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)，擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開。實(shí)驗(yàn)材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等，只能從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，即從試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)到擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，不得逆向流動(dòng)。實(shí)驗(yàn)室的氣流也應(yīng)從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，不得逆向流動(dòng)。各工作區(qū)頂部應(yīng)安裝紫外燈，紫外燈的波長為254nm，每20㎡一支40W的紫外燈。

三、PCR實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制

四大區(qū)域應(yīng)形成單向流線、宜采用全送全排。

各區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗(yàn)工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護(hù)屏障，避免實(shí)驗(yàn)之間的相互干擾，防止氣溶膠擴(kuò)散對實(shí)驗(yàn)過程造成污染。

PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求，但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式，嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)壓力要求。

另外，PCR實(shí)驗(yàn)室內(nèi)通常有生物安全柜、通風(fēng)柜等生產(chǎn)設(shè)備，這類設(shè)備排風(fēng)量大且使用時(shí)間有間隔性，并不與空調(diào)系統(tǒng)運(yùn)行時(shí)間一致，這就導(dǎo)致有這些設(shè)備的房間在設(shè)備啟停的時(shí)候很容易失壓，原本正常的壓力梯度瞬間就破壞了。這正是PCR實(shí)驗(yàn)室空調(diào)系統(tǒng)設(shè)計(jì)的難點(diǎn)所在。

四、PCR實(shí)驗(yàn)室裝修裝飾

材料要求：

實(shí)驗(yàn)室圍護(hù)結(jié)構(gòu)應(yīng)牢固、氣密性好。所有陰陽角宜采用圓弧過渡，墻體內(nèi)壁光潔、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒。地面使用PVC卷材或環(huán)氧樹脂自流坪，材料應(yīng)滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。

必備條件：

1、必須擁有標(biāo)準(zhǔn)的的PCR熒光實(shí)驗(yàn)室。

2、檢測設(shè)備必須符合標(biāo)準(zhǔn)PCR熒光實(shí)驗(yàn)室設(shè)置要求：熒光定量PCR儀+實(shí)時(shí)熒光定量試劑+通用電腦+自動(dòng)分析軟件，構(gòu)成PCR-DNA/RNA實(shí)時(shí)熒光定量檢測系統(tǒng)。

3、必須通過國家臨床檢驗(yàn)中心的驗(yàn)收和認(rèn)證。

4、PCR實(shí)驗(yàn)室必須建立嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理制度、建立標(biāo)準(zhǔn)化操作程序（SOP）、建立系列質(zhì)量管理文件等，確保實(shí)驗(yàn)室日常運(yùn)行符合國家衛(wèi)生部的要求，確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確、確保實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生安全，確保實(shí)驗(yàn)室長期穩(wěn)定運(yùn)行。

5、必須在無菌無塵環(huán)境下進(jìn)行操作。

五、PCR 實(shí)驗(yàn)室的工作流程

首先，需要采集合適的樣本。樣本的類型根據(jù)檢測的目的而定，可以是血液、組織、細(xì)胞等。接著采集到的樣本需要進(jìn)行處理，以提取出其中的 DNA 或 RNA。這個(gè)過程需要嚴(yán)格的操作規(guī)范，以確保樣本的質(zhì)量和純度。然后，將提取出的 DNA 或 RNA 加入到 PCR 反應(yīng)體系中，在特定的溫度和時(shí)間條件下進(jìn)行擴(kuò)增。PCR 擴(kuò)增過程需要精確的溫度控制和時(shí)間管理，以確保擴(kuò)增的準(zhǔn)確性和效率。最后擴(kuò)增后的產(chǎn)物需要進(jìn)行檢測和分析。常用的檢測方法包括凝膠電泳、熒光定量 PCR 等。通過檢測和分析，可以確定樣本中是否存在特定的 DNA 或 RNA 片段，以及其含量和性質(zhì)。

六、PCR 實(shí)驗(yàn)室的重要性

1、快速準(zhǔn)確的檢測

PCR 技術(shù)具有高度的敏感性和特異性，能夠在短時(shí)間內(nèi)檢測出微量的病原體或基因突變。這對于疾病的早期診斷和治療至關(guān)重要。

2、為科學(xué)研究提供有力支持

PCR 實(shí)驗(yàn)室為生命科學(xué)研究提供了強(qiáng)大的工具，幫助科學(xué)家們深入了解生命的奧秘，推動(dòng)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展。

3、保障公共衛(wèi)生安全

在傳染病防控、食品安全等領(lǐng)域，PCR 實(shí)驗(yàn)室能夠及時(shí)檢測出病原體，為公共衛(wèi)生安全提供保障。

總之，PCR 實(shí)驗(yàn)室是一個(gè)充滿科技感的地方。它通過先進(jìn)的技術(shù)手段，為疾病診斷、科學(xué)研究和公共衛(wèi)生安全提供了強(qiáng)有力的支持。隨著科技的不斷進(jìn)步，PCR 實(shí)驗(yàn)室的作用將會(huì)越來越重要，為人類的健康和發(fā)展做出更大的貢獻(xiàn)。